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細胞實驗技術交流之細胞培養(yǎng)儀器及功能簡介

時間:2021/8/16 10:35:46

準備區(qū)的主要功能是進行清洗、消毒、準備工作;制備區(qū)主要是用來進行培養(yǎng)基、試劑配置;貯存區(qū)則是用于細胞庫及物品存放;無菌區(qū)是實驗人員進行更衣緩沖及操作培養(yǎng)的地方。而細胞培養(yǎng)過程中就功能分類又可以劃分為細胞培養(yǎng)、貯存、配液和滅菌4個部分。
細胞間的組成一般分為準備區(qū),制備區(qū),貯存區(qū)和無菌區(qū)4個區(qū)域。

準備區(qū)的主要功能是進行清洗、消毒、準備工作;制備區(qū)主要是用來進行培養(yǎng)基、試劑配置;貯存區(qū)則是用于細胞庫及物品存放;無菌區(qū)是實驗人員進行更衣緩沖及操作培養(yǎng)的地方。而細胞培養(yǎng)過程中就功能分類又可以劃分為細胞培養(yǎng)、貯存、配液和滅菌4個部分。

一.細胞培養(yǎng)儀器及簡介

【1.超凈工作臺】

細胞培養(yǎng)一般采用垂直流超凈工作臺,正壓狀態(tài),氣體外泄,只保護操作對象,而不保護工作人員和實驗室環(huán)境。

紫外照射實現殺菌功能,紫外滅菌(表面)+臭氧滅菌(死角,擋板關閉),每次紫外照射20-30min,鼓風10min后使用(注意培養(yǎng)室換風),潔凈度達到百級。

紫外燈在3000小時后功率會將至原來的70%,及時更換上方的粗濾布定期拆下清洗。
細胞培養(yǎng)儀器
【2.生物安全柜】

負壓狀態(tài),氣體不外泄,既保護樣品,更側重于保護操作人員和環(huán)境,二級安全細胞,攜帶病毒(如hele/kB),原代培養(yǎng)的臨床人源樣本(真菌),慢病毒相關實驗。

【3.CO2鋼瓶】

CO2鋼瓶主要用于CO2氣體的貯存。在細胞培養(yǎng)的過程中大多數細胞都是需要在CO2含量為5%的條件下進行的,CO2鋼瓶主要連接培養(yǎng)箱用于CO2含量的穩(wěn)定維持。

【4.倒置顯微鏡】

倒置式顯微鏡是細胞培養(yǎng)實驗室日常工作常規(guī)必備設備,主要用于日常了解細胞的生長情況并觀察有染發(fā)生,如資金允許,建議選用配置有照相系統(tǒng)的相差顯微鏡、解剖顯微鏡、熒光顯微鏡、錄像系統(tǒng)或縮時電影拍攝裝置等,可隨時拍攝并記錄細胞生長情況。

【5.臺式離心機】

離心機是利用離心力對混合液(含有固形物)進行分離和沉淀的一種專用儀器,主要用與制備細胞懸液、調整細胞密度、洗滌和收集細胞。細胞培養(yǎng)中的離心速率一般為300xg(約1000rpm),5-10min,過高的轉速,將造成細胞死亡。根據不同需求,有大容量、可調溫度離心機、高速離心機和低溫冷凍離心機等更多功能離心機可選擇。

【6.CO2培養(yǎng)箱】

CO2是細胞的代謝產物,是細胞生長的必需成分,又與維持培養(yǎng)液的PH相關。細胞培養(yǎng)中,O2、CO2都是細胞生長的必要條件,CO2培養(yǎng)箱有干式與濕式,培養(yǎng)條件一般設置為37℃,5%CO2。CO2培養(yǎng)箱水盤的水防止污染的方式采用無菌水+定期2周更換+防腐劑(0.02%疊氮鈉或者2%硫酸銅。

【7.細胞計數板(器)】

細胞計數器是集計數、統(tǒng)計、顯示為一體的微電腦控制的計數儀器、計數可靠、使用方便。

【8.移液器】

移液器的主要作用是在細胞培養(yǎng)的過程中進行培養(yǎng)基等液體的吸取和移除。在細胞培養(yǎng)過程中用到的主要量程由10ul/100ul/200ul/1000ul組成。
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